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      病毒保存液: 臨床診斷中的無(wú)名英雄

      每一項(xiàng)準(zhǔn)確的醫(yī)療診斷背后都有一個(gè)多步驟的過(guò)程,首先是正確采集臨床樣本并運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室。從患者到實(shí)驗(yàn)室的過(guò)程充滿挑戰(zhàn),可能會(huì)影響樣本的完整性。如果沒(méi)有合適的儲(chǔ)存條件,脆弱的病毒顆粒會(huì)迅速降解。這就是病毒保存液的作用所在,它在穩(wěn)定樣本和實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的病毒診斷檢測(cè)方面發(fā)揮著不可或缺但卻未被充分認(rèn)識(shí)的作用。

      病毒保存液

      什么是病毒保存液?

      病毒保存液是指在臨床樣本從診所和醫(yī)院運(yùn)往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析的途中,為保持樣本中病毒的活力而配制的溶液。這些保存液可使病毒在室溫或冷藏溫度下長(zhǎng)時(shí)間(通常長(zhǎng)達(dá) 48 小時(shí))保持穩(wěn)定。

      病毒保存液配方包含幾種關(guān)鍵成分:

      ?平衡鹽溶液保持適當(dāng)?shù)膒H值,以保持病毒活力。常見(jiàn)的選擇有生理鹽水、PBS緩沖液或細(xì)胞保存液(如漢克平衡鹽溶液)。

      ?牛血清白蛋白或胎牛血清等蛋白可提供保護(hù)性分子來(lái)保護(hù)病毒顆粒。

      ?蔗糖等糖類是保持病毒完整性的穩(wěn)定劑。

      ?抗菌劑(包括抗生素和抗真菌劑)可抑制微生物的過(guò)度生長(zhǎng),以免破壞脆弱的病毒。

      當(dāng)這些成分組合成一個(gè)優(yōu)化配方時(shí),病毒保存液就能為可能含有病毒的臨床樣本提供一個(gè)理想的環(huán)境,使其在實(shí)驗(yàn)室分析之前不受損壞。

      病毒運(yùn)輸?shù)膭?chuàng)新

      雖然傳統(tǒng)的病毒保存液含有液體緩沖溶液,但科學(xué)的進(jìn)步已經(jīng)催生了其他運(yùn)輸方法。預(yù)裝病毒保存液的單個(gè)塑料瓶或管非常方便,可確保每個(gè)樣本自始至終都有保護(hù)保存液。

      最近,創(chuàng)新技術(shù)產(chǎn)生了完全不需要液體保存液的病毒運(yùn)輸系統(tǒng)。這些干式轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)提供無(wú)菌空管或空瓶,管內(nèi)通常有泡沫或其他基質(zhì),有助于穩(wěn)定樣本。干式系統(tǒng)省去了將液體保存液等分到各個(gè)運(yùn)輸瓶中的額外步驟,從而簡(jiǎn)化了工作流程。鼻咽拭子等臨床樣本可直接放入空管中,從而縮短了處理時(shí)間。

      病毒保存液的應(yīng)用

      1. 呼吸道病毒檢測(cè)

      PCR 等分子技術(shù)已成為診斷流感、RSV 和 SARS-CoV-2 等呼吸道病毒的黃金標(biāo)準(zhǔn)。然而,這些方法依賴于樣本中完整的病毒顆粒。為進(jìn)行呼吸道病毒檢測(cè)而采集的鼻咽拭子是極其脆弱的樣本,需要在運(yùn)輸過(guò)程中加以保護(hù)。病毒保存液可防止樣本降解,從而使實(shí)驗(yàn)室分析準(zhǔn)確反映臨床情況。

      2. 監(jiān)測(cè)計(jì)劃

      公共衛(wèi)生監(jiān)測(cè)計(jì)劃跟蹤流行的病毒株,以監(jiān)測(cè)新型或危險(xiǎn)疫情的爆發(fā)。例如,世界衛(wèi)生組織的全球流感監(jiān)測(cè)和響應(yīng)系統(tǒng)每年從世界各地的國(guó)家流感中心接收 50 多萬(wàn)份流感陽(yáng)性樣本。病毒保存液可保存從偏遠(yuǎn)地區(qū)運(yùn)來(lái)的流感樣本,以便對(duì)其進(jìn)行抗病毒耐藥性等關(guān)鍵病毒特征的分析。有效的運(yùn)輸介質(zhì)可實(shí)現(xiàn)對(duì)流感多樣性的全面跟蹤。

      3. 疫情調(diào)查

      當(dāng)新型疫情爆發(fā)時(shí),如之前的 COVID-19 和寨卡疫情,病毒保存液可將樣本運(yùn)送到有能力進(jìn)行專門(mén)檢測(cè)的集中實(shí)驗(yàn)室,從而為調(diào)查提供便利。如果沒(méi)有適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì),樣本運(yùn)輸?shù)难诱`會(huì)使樣本失去作用。在 COVID-19 大流行發(fā)生的過(guò)程中,運(yùn)輸介質(zhì)使衛(wèi)生部門(mén)能夠快速運(yùn)送來(lái)自多個(gè)地點(diǎn)的數(shù)千份樣本,以跟蹤并確定其特征。

      病毒保存液的優(yōu)點(diǎn)

      - 保持樣本完整性。通過(guò)穩(wěn)定脆弱的病毒顆粒,運(yùn)輸保存液可防止出現(xiàn)假陰性結(jié)果,并為實(shí)驗(yàn)室提供準(zhǔn)確反映臨床情況的樣本。

      - 提供靈活性。運(yùn)輸介質(zhì)允許臨床樣本遠(yuǎn)距離運(yùn)輸,并能承受運(yùn)輸條件而不會(huì)發(fā)生病毒降解。

      - 可在環(huán)境溫度下運(yùn)輸。保存液配方使大多數(shù)樣本無(wú)需冷鏈運(yùn)輸。

      - 簡(jiǎn)化工作流程。預(yù)裝保存液的獨(dú)立試管或干式運(yùn)輸系統(tǒng)可減少處理步驟。

      - 延長(zhǎng)存活時(shí)間。貨架期研究可驗(yàn)證病毒在不同保存液中的穩(wěn)定性,為可靠的運(yùn)輸提供指導(dǎo)。

      - 通用性。配方廣泛的運(yùn)輸保存液適用于各種可能含有病毒的樣本類型。

      - 降低成本。避免重復(fù)采集樣本或?qū)訇幮詷颖具M(jìn)行分子檢測(cè)的費(fèi)用。

      - 支持疫情應(yīng)對(duì)。允許實(shí)驗(yàn)室快速接收、處理和檢測(cè)大量樣本。

      簡(jiǎn)而言之,病毒保存液有助于確保檢測(cè)結(jié)果可靠地反映患者的病情。盡管運(yùn)輸介質(zhì)是在幕后工作,但它對(duì)準(zhǔn)確診斷卻有著重要影響。

      克服運(yùn)輸介質(zhì)的挑戰(zhàn)

      病毒保存液在帶來(lái)巨大優(yōu)勢(shì)的同時(shí),也面臨著一些挑戰(zhàn):

      - 配方很重要。保存液必須與 PCR 等下游檢測(cè)方法兼容。某些成分會(huì)干擾敏感的分子分析。

      - 保質(zhì)期限制。運(yùn)輸保存液根據(jù)成分確定了穩(wěn)定性和有效期。供應(yīng)鏈問(wèn)題最近使重要運(yùn)輸用品的獲取變得復(fù)雜。

      - 有限的存活時(shí)限。雖然與未受保護(hù)的樣本相比,病毒的存活時(shí)間較長(zhǎng),但如果不進(jìn)行超低溫儲(chǔ)存,病毒最終還是會(huì)降解。

      - 需要培訓(xùn)。正確的樣本采集和處理是最大限度提高運(yùn)輸介質(zhì)效率的關(guān)鍵。

      - 無(wú)菌至關(guān)重要。受污染的保存液會(huì)使脆弱的樣本不堪重負(fù)。嚴(yán)格的質(zhì)量控制可確保傳輸系統(tǒng)保持無(wú)菌狀態(tài)。

      盡管存在這些障礙,但創(chuàng)新仍在繼續(xù),以優(yōu)化病毒保存液,并為簡(jiǎn)化工作流程提供創(chuàng)造性的解決方案。

      COVID-19 大流行聚焦

      COVID-19 大流行讓人們看到了病毒保存液的關(guān)鍵作用,盡管這一作用未得到充分重視?;?RT-PCR 診斷的分子檢測(cè)成為檢測(cè) SARS-CoV-2 感染的黃金標(biāo)準(zhǔn)。但不堪重負(fù)的實(shí)驗(yàn)室突然需要安全地處理大量涌入的鼻咽拭子,這些拭子來(lái)自廣泛的檢測(cè)項(xiàng)目。病毒保存液允許在靈活的運(yùn)輸條件下將標(biāo)本運(yùn)送到具有快速處理能力的中心實(shí)驗(yàn)室。

      由于供應(yīng)鏈中斷導(dǎo)致咽拭子和保存液供應(yīng)緊張,生產(chǎn)商加大了生產(chǎn)力度,而政府則協(xié)調(diào)了更具戰(zhàn)略性的分配。在傳統(tǒng)病毒保存液缺乏的情況下,干式運(yùn)輸系統(tǒng)和直接轉(zhuǎn) PCR 標(biāo)本采集試劑盒等創(chuàng)新技術(shù)簡(jiǎn)化了工作流程。

      雖然 COVID-19 突顯了薄弱環(huán)節(jié),但也揭示了優(yōu)勢(shì)所在?,F(xiàn)有的流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)利用病毒保存液迅速轉(zhuǎn)入冠狀病毒監(jiān)測(cè)。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化的協(xié)議,可以對(duì)全球各地提交的病毒基因組序列進(jìn)行比較。幾十年前制定的運(yùn)輸介質(zhì)制備方法久經(jīng)考驗(yàn),有助于解決供應(yīng)短缺問(wèn)題。通過(guò)這一切,病毒保存液穿越了遙遠(yuǎn)的距離,使公共衛(wèi)生機(jī)構(gòu)能夠在 SARS-CoV-2 出現(xiàn)和發(fā)展時(shí)對(duì)其進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

      未來(lái)之路

      病毒運(yùn)輸媒介的未來(lái)會(huì)怎樣?盡管 COVID-19 加快了創(chuàng)新的步伐,但仍有許多成果有待實(shí)現(xiàn)。增強(qiáng)型運(yùn)輸介質(zhì)配方可以進(jìn)一步穩(wěn)定脆弱樣本,并延長(zhǎng)運(yùn)輸時(shí)限和條件。干態(tài)保存方法可減少對(duì)冷鏈運(yùn)輸?shù)男枨螅岣呖杉靶?。整合了運(yùn)輸穩(wěn)定性解決方案的樣本采集設(shè)備可簡(jiǎn)化工作流程。

      病毒爆發(fā)很可能會(huì)再次出現(xiàn),但對(duì)病毒運(yùn)輸系統(tǒng)進(jìn)行戰(zhàn)略性投資有助于加強(qiáng)未來(lái)的準(zhǔn)備和應(yīng)對(duì)工作。從根本上說(shuō),提高運(yùn)輸穩(wěn)定性解決方案的可及性有助于改善全球公共衛(wèi)生監(jiān)測(cè)工作。正如病毒保存液悄無(wú)聲息地穿越背景,實(shí)現(xiàn)了對(duì) SARS-CoV-2 的監(jiān)測(cè)一樣,持續(xù)優(yōu)化病毒保存液可以加強(qiáng)對(duì)下一種新型病原體的診斷能力。

      病毒保存液在診斷過(guò)程中發(fā)揮著不可或缺的作用,盡管它常常不被人們所認(rèn)識(shí)。這位無(wú)名英雄為臨床樣本提供了安全通道,使實(shí)驗(yàn)室分析能夠可靠地揭示潛伏在樣本中的病毒威脅。由于新出現(xiàn)的傳染病威脅需要提高警惕,病毒保存液仍然是從病人到實(shí)驗(yàn)室的診斷過(guò)程中的堅(jiān)定盟友。

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